Culturing Escherichia coli cells

Scope of the method

The Method relates to
  • Other
Recombinant DNA technology
The Method is situated in
  • Basic Research
  • Regulatory use - Routine production
Type of method
  • In vitro - Ex vivo
This method makes use of
  • Other (e.g. bacteria)
Escherichia coli, DH5alpha, C43 (DE3), BL21 (DE3)

Description

Method keywords
  • bacterial cells
  • cell culture
  • protein expression
  • E. coli
  • prokaryote
Scientific area keywords
  • microbiology
  • biotechnology
  • Recombinant DNA technology
Method description

E. coli is one of the organisms of choice for the production of recombinant proteins. DH5 alpha cells are commonly used for maintenance, propagation and mutation, whilst BL21(DE3) and C43(DE3) are mainly used for expression of the transgene. The advantage of C43(DE3) is that is used to produce proteins that are expressed poorly in BL21 (DE3) or that are very toxic to the host organism. All strains can be cultured in Lysogeny Broth (LB) medium or LB agar plates with an appropiate antibiotic for positive selection of the clones. For induction of protein expression, isopropyl-b-thiogalactoside (IPTG) in a concentration of 0.2 mM - 1 mM can be used. In case you have a problems with leaky expression, 1 % w/v glucose can be added to the LB medium for excellent growth of the bacteria. Transformation of the cells can be achieved by heat shock or electroporation.

Hiện nay, có rất nhiều trang thể thao bóng đá trực tuyến, nhưng đa số đều có những quảng cáo hoặc chất lượng ko cao hoặc phát lậu, Chúng tôi socolive với bản quyền trực tiếp phát sóng trực tiếp , hứa hẹn sẽ cung cấp cho các bạn những trận bóng đá hấp dẫn nhấtxem bóng đá trực tuyến

Kênh của chúng tôi luôn luôn thân thiện với tất cả mọi người, mitomcung cấp những trận đấu trực tiếp của Việt Nam và toàn cầu, với video Full HD , ko lag ko giật, đảm bảo cung cấp cho bạn những giây phút bóng đá tuyệt vời nhất

Được xem là một trang bóng đá hàng đầu Việt Nam, chúng tôi cung cấp cho khán giả tất cả các trận đấu , trực tiếp tại hiện trường, bạn có thể đón xem tất cả các giải đấu tại đây xoilac , nơi mà bạn có thể thỏa mãn niềm đam mê với bóng đá mà không lo bị dán đoạn vì chất lượng trang kém

Ở đây chúng tôi cung cấp những trận bóng hấp dẫn nhất , với hình ảnh sắc nét, trang web thân thiện với tất cả mọi người Việt Nam, hãy nhấn vào và đặt 90p lịch cho trận đấu mà bạn yêu thích nào

Lab equipment
  • Biosafety cabinet;
  • Bunsen burner;
  • Petri dishes.
Method status
  • Still in development
  • History of use
  • Internally validated

Pros, cons & Future potential

Advantages
  • Fast growth kinetics (doubling time 20 mins);
  • High cell density cultures are easily achieved;
  • Readily available and inexpensive components for media;
  • Easy transformation.
Challenges

No post-translational modifications (i.e. prokaryote).

Future & Other applications

Every researcher that will need a prufied protein can obtain it in a recombinant form.

References, associated documents and other information

Associated documents

Contact person

Jessie Neuckermans

Organisations

Vrije Universiteit Brussel (VUB)
Pharmaceutical and Pharmacological Sciences
In Vitro Toxicology and Dermato-Cosmetology
Belgium